本文目录一览：

细胞外泌体收集之前用什么样的培养液

细胞外泌体收集之前用什么样的培养液 绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。

一般培养24-48h后细胞即可分离外泌体，在特殊情况下，如在培养基中添加特殊的化学物质，培养15-60min即可收集。因细胞死亡会分泌小体，所以在研究外泌体时细胞的死亡率一定要控制 5% 之内。未经处理的FBS中含有大量的外源外泌体，所以细胞培养一定要用经过处理不含外泌体的FBS。

收集细胞培养液或生物体液（如血液、尿液等），首先以较低转速（如 3000g）离心 15 分钟，去除细胞碎片和大的颗粒物质。将上清液转移至新的离心管中，然后以 10000g 离心 30 分钟，进一步去除较大的囊泡等杂质。

外泌体含有丰富的生物活性物质，如蛋白质、核酸和脂质等。以下是一种使用超速离心法提取外泌体的步骤：材料 细胞培养上清液 离心管 0.22 μm 的滤膜（例如Millipore）超速离心机（例如Beckman Coulter）步骤 将细胞培养上清液通过 0.22 μm 滤膜过滤，以去除杂质和细胞碎片。

外泌体提取后，需要合理保存。纯化后的外泌体可在4℃条件下保存不超过一周，或在-80℃条件下长期保存，避免反复冻融。对于血清样本，需要使用EDTA抗凝管采集，4℃下离心处理后，收集血清并进行-80℃保存。对于尿液和细胞样本的采集，需要按照特定的步骤进行，确保样本的正确处理和保存。

采集血培养标本及运送流程

1、静脉穿刺和培养瓶接种程序：用10ml注射器无菌穿刺取血后，排尽针头内空气，勿换针头(如果行第二次穿刺或用头皮针取血时，应换针头)，采血后直接注入血培养瓶，先注5ml于厌氧培养瓶，并注意避免注入空气，后注其它培养瓶，轻轻混匀以防血液凝固或严格按厂商推荐的方法采血。

2、采集完成后，血液样本会被及时送到微生物实验室。培养与观察：微生物实验室接到标本后，会将血培养放到专用的培养箱当中进行培养。每天观察血培养的生长曲线，监测是否有细菌生长。细菌检测与报告：如果有细菌生长，仪器会自动报警。

3、血培养操作指南详细介绍如下：采血时机与量：采血时机：通常建议在用药前进行，以准确反映病原体情况。采血量：一般推荐进行23次，每次至少10毫升。婴幼儿采血量需相应减少。标本处理与运送：立即送检：采集后的血样应立即送至实验室，避免冷藏或温度不当的孵育环境。

4、所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在2h内。如果不能及时送检，宜置于室温环境。血培养瓶送到检验科放入培养箱前，不应暂存于冰箱内。送检标本应正确粘贴条形码，注明采样时间和送检时间。安全防护：放标本的容器必须防漏，禁止将渗漏的标本送往实验室。

5、血培养标本的采集方法主要包括以下几点：注入密封瓶法：步骤：首先去除铝盖中心部分，对瓶盖进行常规消毒，并更换无菌针头。然后将抽出的血液注入瓶内，轻轻摇匀以确保血液均匀分布。注入三角烧瓶法：瓶口处理：瓶口以棉塞及纱布严密包封。

6、血培养标本采集方法主要包括以下步骤，以提高细菌培养阳性率：选择合适的容器 密封瓶：使用专用的血培养瓶，去除铝盖中心部分后，对瓶盖进行常规消毒，并更换无菌针头。将抽出的血液注入瓶内，并轻轻摇匀，以确保血液与培养基充分混合。

血培养标本采集方法是什么

1、血培养标本采集方法主要包括以下步骤，以提高细菌培养阳性率血培养标本采集方法：选择合适血培养标本采集方法的容器 密封瓶血培养标本采集方法：使用专用血培养标本采集方法的血培养瓶，去除铝盖中心部分后，对瓶盖进行常规消毒，并更换无菌针头。将抽出的血液注入瓶内，并轻轻摇匀，以确保血液与培养基充分混合。三角烧瓶：若使用三角烧瓶作为采集容器，瓶口应以棉塞及纱布严密包封。

2、血培养标本的采集方法主要包括以下几步：注入密封瓶法：去除铝盖中心部分：首先，需要去除密封瓶的铝盖中心部分。消毒瓶盖：对瓶盖进行常规消毒。更换无菌针头：更换为无菌针头，以防止污染。注入血液：将抽出的血液注入瓶内，并轻轻摇匀以确保血液均匀分布。

3、在进行血液培养时，首先需要确保使用的工具和设备均经过严格消毒处理，以避免细菌污染。首先，将铝盖中心部分去除，对瓶盖进行常规消毒，并更换为无菌针头。接着，将抽取的血液注入密封瓶中，轻轻摇匀，确保血液与瓶内的培养液充分混合。当需要将血液注入三角烧瓶时，必须确保瓶口的严密封闭。

4、收集方式手卫生：洗手消毒或手消毒。（最非常容易忽视，却也是很重要的一条）血培养标本采集方法；提前准备血培养瓶：依据检测审批单，挑选适合的血培养瓶，查验血培养瓶有没有损坏、保存期，用75%医用酒精消毒血培养瓶盖，功效60s，待干。

5、生化检验用的血液标本可来自于静脉、动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本，静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采血主要用于儿童，血气分析多使用动脉血。